《植物生理学报》 2005, 41(6): 815-819

用绿色荧光蛋白和洋葱表皮细胞检测拟南芥rd29A基因启动子活性的方法

张俊莲¹ 王蒂^2,* 张金文² 陈正华³

甘肃农业大学 1 园艺系，2 农学院，兰州 730070；3 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站，北京 100101

通信作者：王蒂；E-mail: wangd@gsau.edu.cn；Tel: 0931-7631140

摘　要：

将 rd29A 基因的启动子与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合在一起，构建成植物表达载体，并以 CaMV35S 启动子驱动 的 GFP 基因的植物表达载体为对照，用基因枪介导法转化置于 4 种类型培养基上的洋葱表皮细胞。对其进行不同温度下 的培养，16 h 后观察 GFP 基因瞬时表达水平的结果表明，rd29A 启动子对高盐和脱水逆境的响应较温度显著，特别是在 含 PEG6000 的培养基上，细胞无破损，绿色荧光强烈，适合于 GFP 的瞬时表达。而高盐由于易导致细胞出现离子毒害， 不宜作为 GFP 瞬时表达的培养基。

关键词：rd29A 启动子；CaMV35S 启动子；绿色荧光蛋白(GFP) ；洋葱表皮细胞；拟南芥

收稿：2004-12-06   修定：2005-04-20

资助：甘肃省科技攻关项目(2GS054-A41-005-01)和国家高技术研究与发展计划(“863”计划)项目(2004AA241132)。

用绿色荧光蛋白和洋葱表皮细胞检测拟南芥rd29A基因启动子活性的方法

张俊莲¹ 王蒂^2,* 张金文² 陈正华³

甘肃农业大学 1 园艺系，2 农学院，兰州 730070；3 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站，北京 100101

Corresponding author: ; E-mail: wangd@gsau.edu.cn; Tel: 0931-7631140

Abstract:

将 rd29A 基因的启动子与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合在一起，构建成植物表达载体，并以 CaMV35S 启动子驱动 的 GFP 基因的植物表达载体为对照，用基因枪介导法转化置于 4 种类型培养基上的洋葱表皮细胞。对其进行不同温度下 的培养，16 h 后观察 GFP 基因瞬时表达水平的结果表明，rd29A 启动子对高盐和脱水逆境的响应较温度显著，特别是在 含 PEG6000 的培养基上，细胞无破损，绿色荧光强烈，适合于 GFP 的瞬时表达。而高盐由于易导致细胞出现离子毒害， 不宜作为 GFP 瞬时表达的培养基。

Key words: rd29A 启动子；CaMV35S 启动子；绿色荧光蛋白(GFP) ；洋葱表皮细胞；拟南芥